本文標(biāo)題："生物學(xué)、藥理學(xué)、毒理學(xué)等研究用顯微鏡出售！"

發(fā)布者：yiyi ------ 分類: 站內(nèi)動(dòng)態(tài) ------ 人瀏覽過(guò) -----時(shí)間：2012-8-24 5:30:25

學(xué)習(xí)培養(yǎng)哺乳類動(dòng)物細(xì)胞，以利在細(xì)胞或分子層次進(jìn)行生物相關(guān)研究。亦可作為細(xì)胞分子生物學(xué)、藥理學(xué)、毒理學(xué)等研究之重要工具。

原理：細(xì)胞是構(gòu)成生命的基本單位，在自然界中存在有單細(xì)胞生物與多細(xì)胞生物。細(xì)菌、真菌等單細(xì)胞生物，單一細(xì)胞即能執(zhí)行生命程序；高等動(dòng)植物則是由許多細(xì)胞所組成的生命體，藉由分化作用使每個(gè)細(xì)胞執(zhí)行不同的功能，共同完成生命程序。但不論何種生物的細(xì)胞內(nèi)都有許多不同分子，在維持細(xì)胞生命時(shí)負(fù)責(zé)調(diào)控其生理與生化的功能。所以，如果想要在細(xì)胞分子生物的相關(guān)領(lǐng)域進(jìn)行研究，細(xì)胞的培養(yǎng)是一門(mén)基本的技術(shù)。以人工配制的基礎(chǔ)培養(yǎng)液，加上動(dòng)物血清與必需生長(zhǎng)激素，可讓細(xì)胞在離開(kāi)生物體后，還可用人工方式培養(yǎng)，讓細(xì)胞得以存活并生長(zhǎng)、增殖。

儀器用具：過(guò)濾瓶、血清瓶、抽氣馬達(dá)、過(guò)濾頭(濾膜孔徑0.22 ?m)、濾膜(孔徑0.45 ?m)、二氧化碳水套式培養(yǎng)箱、倒立式顯微鏡、無(wú)菌操作臺(tái)、恒溫水浴槽、酸堿度計(jì)、10公分細(xì)胞培養(yǎng)皿、無(wú)菌定量吸管。

藥品試劑：小鼠胚胎細(xì)胞株NIH/3T3、細(xì)胞培養(yǎng)基粉末DMEM (high glucose)、碳酸氫鈉、濃鹽酸水溶液 (6 N HCl)、100X抗生素PS混合液、小牛血清 (bovine calf serum, CS)、胰蛋白酶-EDTA (Trypsin-EDTA) 溶液、10X Phospate Buffer Saline (80 g NaCl, 2 g KCl, 14.4 g Na2HPO4, 2.4 g KH2PO4 加蒸餾水至1公升)。

步驟：

1. 熱去活化(heat inactivation)小牛血清：

(1) 將小牛血清自-80℃或-20℃冷凍柜移至4℃冷藏柜解凍

(2) 置于56℃的恒溫水浴槽30分鐘 (期間不時(shí)搖晃)。

(3) 以無(wú)菌管分裝，并貯存于-20℃下備用，或直接加入非完全細(xì)胞培養(yǎng)液中以配制完全培養(yǎng)液。

2. 配制細(xì)胞培養(yǎng)液

(1) DMEM (Dulbecco’s Modified Eagle Medium)：將足以配制1公升培養(yǎng)液的培養(yǎng)基粉末與1.5 g的碳酸氫鈉先溶于950 ml的二次水，再以6 N HCl調(diào)整pH至7.0–7.2之間；加二次水至總體積為1公升后，先以0.45 ?m濾膜粗濾，再移至無(wú)菌操作臺(tái)內(nèi)，以0.22 ?m過(guò)濾頭過(guò)濾，置于4℃?zhèn)溆谩?/div>

(2) 完全培養(yǎng)液 (Complete Medium)：每公升DMEM培養(yǎng)液添加10 ml的100X抗生素PS混合液，使青黴素(penicillin)與鏈黴素(streptomycin)的濃度分別為100 IU/ml及100 ?g/ml，并加入10%小牛血清。

3. 細(xì)胞次培養(yǎng) (subculture)：

(1) 將培養(yǎng)皿自含有5%二氧化碳、37℃的恒溫箱中移至倒立式顯微鏡下，觀察細(xì)胞密度與其生長(zhǎng)情形。

(2) 將欲進(jìn)行次培養(yǎng)的培養(yǎng)皿中的原培養(yǎng)液倒于廢液瓶中。

(3) 以適量的1X PBS清洗培養(yǎng)皿上的細(xì)胞。

(4) 加0.5–1 ml的trypsin-EDTA溶液至培養(yǎng)皿中，并前后左右晃動(dòng)培養(yǎng)皿，使trypsin-EDTA溶液均勻覆蓋于細(xì)胞上。

(5) 將培養(yǎng)皿置入二氧化碳水套式培養(yǎng)箱2–3分鐘后，移至顯微鏡下觀察。若細(xì)胞已變圓，即拍打培養(yǎng)皿，并加入1–2 ml培養(yǎng)液沖脫細(xì)胞后，以吸管移至無(wú)菌離心管中。

(6) 以1000 rpm離心5分鐘后，倒掉培養(yǎng)液，輕敲細(xì)胞塊、使之散開(kāi)。

(7) 若要一分為四，則加4ml培養(yǎng)液至離心管中，并用吸管略為抽吸。

(8) 將9 ml培養(yǎng)液加入已標(biāo)示之新細(xì)胞培養(yǎng)皿，再加入1 ml前項(xiàng)之細(xì)胞懸浮液。

(9) 前后左右搖動(dòng)培養(yǎng)皿，使細(xì)胞分散均勻后，置入二氧化碳水套式培養(yǎng)箱培養(yǎng)。

無(wú)菌操作臺(tái) 過(guò)濾頭

倒立式顯微鏡二氧化碳水套式培養(yǎng)箱

后一篇文章：生物顯微鏡-生命科學(xué)研究專業(yè)顯微鏡出售門(mén)市在哪里 »
前一篇文章：« 什么是皮膚絲狀菌？皮膚絲狀菌詳解！

tags:產(chǎn)品,實(shí)驗(yàn),光學(xué),生物顯微鏡,精密儀器,

生物學(xué)、藥理學(xué)、毒理學(xué)等研究用顯微鏡出售！,熒光顯微鏡現(xiàn)貨供應(yīng)

本頁(yè)地址：http://www.threebear.com.cn/wz/94.html轉(zhuǎn)載注明
本站地址：http://www.threebear.com.cn/
http://www.xianweijing.org/

資訊中心：

站內(nèi)動(dòng)態(tài)

上海光學(xué)儀器廠丨生物顯微鏡分部經(jīng)營(yíng)理念:"-優(yōu)異的品質(zhì)-誠(chéng)信的價(jià)格-完善的售后" -

版權(quán)申明：Copyright2012- 2015 禁止拷貝復(fù)制本站的文字和圖片,本站所有版權(quán)由上海光學(xué)儀器廠丨生物顯微鏡分部所有-
生物顯微鏡專賣(mài)-上海光學(xué)儀器廠丨生物顯微鏡分部-本站地址http://www.threebear.com.cn/

友情鏈接：

顯微鏡
金相顯微鏡
光學(xué)顯微鏡

百度統(tǒng)計(jì)：

生物顯微鏡

本文標(biāo)題："生物學(xué)、藥理學(xué)、毒理學(xué)等研究用顯微鏡出售！"

發(fā)布者：yiyi ------ 分類: 站內(nèi)動(dòng)態(tài) ------ strBatchCount+="spn94=94,"人瀏覽過(guò) -----時(shí)間：2012-8-24 5:30:25

生物學(xué)、藥理學(xué)、毒理學(xué)等研究用顯微鏡出售！,熒光顯微鏡現(xiàn)貨供應(yīng)

資訊中心：

延伸閱讀

站內(nèi)動(dòng)態(tài)

生物顯微鏡

熒光顯微鏡

發(fā)布者：yiyi ------ 分類: 站內(nèi)動(dòng)態(tài) ------ 人瀏覽過(guò) -----時(shí)間：2012-8-24 5:30:25