在適條件下對酸雙脂酶進行分解的化學方法 (1)堿分解。已經知道堿能劈開磷酸醋鍵成為RNA的核搪的5-OH基,并從鏈的中部產生2和3一核普磷酸,并在磷酸化的條件下從分子的5一端產生一核普二磷酸,而在非磷酸化條件下從3一端產生一核普。 (2)過碘酸根氧化繼以胺分裂。理論上這個方法適千使低級核若酸鏈從3一端逐步分解。在3一端磷酸化的條件下,末端3一磷酸先被磷酸單醋酶除棄。然后低級核曹酸鏈用過碘酸根處理以氧化末端核褚的2和a碳分子上的經根。在隨后用一種胺處理時,形成一種不穩定的胺復合物,它分裂而產生第一核普酸根的游離堿和第二核昔酸根的暴露的3-磷酸根。IR復這些步驟引致堿從3一端的逐步釋放。假定的作機制如下。 在磷酸單醋酶的影響下TMV-RNA釋放相當于3000到5000核普酸的無機磷酸根。這被解釋為表明大約有6500核普酸的每一完整的RNA分子多帶有一個末端磷酸根,更多的磷酸根端是由于鏈的破裂而產生的。后來用沒有核酸酶的特別純凈的RNA制備物發現,經過E. coli-磷酸單酮酶消化后從TMV-RNA釋放的磷酸根比分子墾I分子量RNA少得多。 這說明TMV-RNA的3一端沒有磷酸化。這個結論得到在適條件下用蛇毒確酸雙脂酶進行分解時每分子量RNA產生少于一分子量核昔酸2一雙磷酸的發現所支持。
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